艾滋病检测_艾友网

艾滋病检测方法分类 抗体、抗原、病毒分离培养

2017-11-21 艾友网

艾滋病实验室检测有抗体检测、抗原检测、病毒分离培养、HIV核酸定量检测、CD4+ T淋巴细胞计数、核酸检测等。常用的检测包括HIV抗体检测、HIV核酸定量检测和CD; T淋巴细胞计数。HIV抗体检测是HIV感染诊断最常用的方法。HIV核酸定量检测和CD4+T淋巴细胞计数是判断疾病进展和治疗时机、评价疗效和预后的两项重要指标。

(一)HIV抗体检测

HIV抗体检测是HIV/AIDS诊断的一项重要指标,敏感性较好,被广泛用于临床和公共卫生工作中。

1.常用HIV抗体筛查检测方法

通常采用血清学方法检测HIV抗体,初筛主要有酶联免疫吸附试验( ELISAk),化学发光或免疫荧光试验和快速检测方法。ELISA适合于一次性对大样本量的检测,但必须在实验室内进行,所需时间较长。快速检测则不需要特殊的仪器设备,可在检测点上进行,且5 -30分钟可得到结果,快速检测可用全血,易采集、不用分离,非实验室人员经培训便可操作,并能直观地判读和解释结果。

(1)酶联免疫吸附试验( ELISA)

ELISA多为单纯HIV抗体检测试剂,HIV抗原抗体联合检测试剂可同时检测血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗体。HIV抗原或抗体包被于固相载体,加入待检样品和酶标记的HIV抗原或抗体,加底物显色,用酶标仪测定结果。有效试验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定。

(2)化学发光或免疫荧光试验

这类试剂采用化学发光或荧光底物,既可检测抗体,也可联合检测抗原抗体。HIV抗原或抗体包被于固相载体,加入待检样品和酶或荧光标记的HIV抗原或抗体,加发光或荧光底物,用发光或荧光仪测定结果。有效试验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定。

(3)快速检测(RT)及其他检测试验

快速试验简便快速,适用于应急检测、门诊急诊检测,也可用于符合要求的目标人群活动场所检测。一般5--30分钟可出结果。

初筛试验呈阳性反应的标本,要通过确证实验,进一步证实受检者是否有HIV感染。

2.HIV抗体筛查检测流程

(1)初筛试验

根据检测目的,选用符合要求的筛查试剂,对样品进行初筛检测。对呈阴性反应的样品,可出具HIV抗体阴性报告,对呈阳性反应的样品,需要进一步复检和确证。

(2)复检试验

对初筛呈阳性反应的样品,应使用原有试剂和另外一种不同原理(或厂家)的试剂,或另外两种不同原理或不同厂家的试剂进行复检试验(见图1-2)。如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂,则复检必须包括一种抗原抗体联合试剂。如两种试剂复检均呈阴性反应,则报告HIV抗体阴性;如均呈阳性反应,或一阴一阳,需送艾滋病确证实验室进行确证试验。如果抗原抗体联合试剂检测呈阳性反应,而抗体试剂检测为阴性反应,则应考虑进行HIV-1 P24抗原或核酸检测,必要时进行随访。

3.HIV抗体确证试验

目前我国采用的确认方法主要是蛋白印迹法( WB),此外还有重组免疫印迹法( RIBA)o确证实验是使用HIV-1/2混合型试剂进行检测,如果呈阴性反应,则报告HIV抗体阴性(—);如果呈阳性反应,则报告HIV-1抗体阳性(+);如果不是阴性反应,但又不满足阳性判断标准,则报告HIV抗体不确定(±)。结合流行病学资料,可以在4周后随访检测,如带型没有进展或呈阴性反应,则报告阴性;如随访期间出现阳性反应,则报告阳性;如随访期间带型有进展,但不满足阳性标准,应继续随访到8周。8周后带型没有进展或呈阴性反应则报告阴性;满足HIV抗体阳性诊断标准则报告阳性,不满足阳性判断标准可视情况决定是否继续随访。随访期间可根据需要,检测病毒核酸或P24抗原作为辅助诊断。如果出现HIV-2型的特异性指示条带,根据实际情况需用HIV-2型QAW3Q免疫印迹试剂再做HIV-2的抗体确证试验或HIV-2核酸检测,以进一步明确HIV-2感染状态。

(二)CD4+T淋巴细胞和HIV病毒载量检测

HIV抗体检测阳性者、正在服用抗病毒药物的患者,需按国家相关要求,定期进行CD4+ T淋巴细胞、病毒载量检测。

1.CD4+ T淋巴细胞:CD4+T淋巴细胞计数检查系一项对每微升血液中的CD4+ T淋巴细胞进行计数的检测,可直接测定患者免疫系统的状态,辅助临床进行疾病分期。按《国家免费艾滋病抗病毒药物治疗手册(第三版)》,推荐对接受抗病毒治疗的艾滋病患者每6个月进行一次CD4+ T淋巴细胞计数检测,以评估治疗效果。

2.HIV病毒载量检测:即HIV核酸定量检测,主要有基于靶核酸扩增RT-PCR、信号放大扩增和实时荧光定量PCR三种技术方法,通过定量测定HIV RNA的含量来确定每毫升血浆中病毒的粒子数(拷贝数),结果一般以国际单位( IU/mL)或拷贝/mL釆表不。三种检测方法原理不同,检测结果之间存在相关关系,但不完全相等,所以要求检测同一个体时,前后检测方法应一致,才能对前后结果进行比较。病毒载量检测最重要的意义是早期和辅助诊断、病程监控、指导抗病毒治疗及疗效判定。

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